[Objectif] Enzyme DSRNA (DSRNASE) est l'un des principaux facteurs permettant de limiter la technologie d'interférence d'ARN (ARN) dans la lutte antiparasitaire, cette étude vise à utiliser des systèmes d'expression procaryote pour obtenir de l'antigène. LMDSRNASE2 et LMDSRNASE3 spécifiquement, dans lequel des anticorps ont été préparés et positionnement des tissus détectés et expression descriptive, et la preuve de la différence de fonction des intestins de décomposition de la décomposition de gènes d'enzyme dans les sauterelles. [Méthode] Séquence d'acides aminés (Genbank) par LMDRNASE2 et LMDSRNASE3: ARW74135.1 et ARW74134.1) Une étude suivante des séquences antigènes LMDRNANASE2 et LMDSRNASE3 (R2 & # 39; R3 & # 39; R3 & # 39;) est sélectionnée en conséquence, selon la Chaîne de longueur totale de LMDNASE2 et LMDNASE3 Edna, la conception de la doublure de la position de coupe enzymatique Bamh I, Hind III a été utilisée pour amplifier la pièce cible avec la technologie PCR et la double enzyme attachée au vecteur PET-32A. Plasmide recombinant à E. coli BL21 (DE3) dans le cytoplasme, ajout de IPTG à la concentration finale est0,5 mmol & # 183; 37 ° C provoque 4 heures après l'extrait de protéines, à l'aide de la méthode de l'électrophorèse SDS pour détecter l'expression de protéines. Planter des escherichia avec des plasmides recombinants, entraînant de nombreuses manifestations, à l'aide de méthodes de colonne de nickel et de chromatographie de la chromatographie r2 et n ° 39; Méthodes protéiques, Bradford pour détecter les niveaux de protéines. Après que deux lapins blancs en Nouvelle-Zélande ont été vaccinés, des anticorps polygonaux de LMDRNASE2 et LMDSRNase3 ont finalement été pris par la méthode ELISA pour déterminer l'effet des anticorps polyclonaux. Les prix sont détectés par WesternBlot pour détecter la spécificité d'anticorps. Extraire la protéine tissulaire entre l'intestin et la moyenne concentrée le 5ème jour de la mouche, et les anticorps de Lmdnanase2 et Lmdsrnanase3 ont été découverts. Enfin, préparer 5 années de vol au 3ème jour, les sections de paraffine intestinale sont sous-capathocycloctrophiques par rapport aux protéines LMDRNANASE2 et LMDNASE3 de l'immunohistochologie. [Résultats] La découverte des cordes d'acides aminés comparées à, lmdsrnase2 et lmdrnasE3 compte 37% de la séquence cohérente, sélectionnez la séquence R2 et n ° 39; et r3 & # 39; Les appâts design, y compris 157 et 153 résidus d'acides aminés, le poids moléculaire théorique est de 17,0 et 16,8 kD. La concentration IPTG est de 0,5 mmol & # 183; L-1, 37 ° C provoque 4 h, l'objectif de protéine dans le corps comprend de grandes expressions. Après avoir prolongé la tension de réorganisation, l'extrait de protéines, séparé par des colonnes de nickel et une chromatographie pour avoir 85% de pureté par rapport à R2 & # 39; la protéine peut être utilisée directement à la vaccination; et r3 & # 39; La pureté des protéines est inférieure à 85%, après filtration de l'électropathie pour prévenir la population néo-zélande de lapin blanche, 36 jours après l'obtention de la précision, la norme est de 1: 102 400, montrant également des effets d'anticorps. La protéase Fusion-lmdsrnasas2 de HurcodySrnase3 est conservée par le laboratoire hybride d'anticorps en polycody, contre des anticorps spécifiques, les résultats montrent que les anticorps de R2 et R3 spécifient lmdsrnase2 et lmdsrnanase3, ne croisent pas croix et cLes bandes maléfiques correspondent à la taille de son anticorps, à l'aide de la méthode de l'épaule occidental, trouvée la protéine LMDSrnass2 dans une expression élevée dans les tissus, mais aucune expression visible n'a été trouvée dans les saucisses moyennes et la protéine lmdrnase3 ne détecte pas dans les tissus moyens et le liquide intestinal moyen. En outre, deux protéines sont des tissus dans la méthode immunitaire et LMDSrnass2 et lmdsrnanase3 ont été trouvés. Dans le cytoplasme du côlon du milieu, la quantité de LMDRNAE3 a une expression faible. [Conclusion] Préparé avec succès LMDRNASE2 et LMDSRNASE3 Les anticorps, le blot occidental et l'analyse immunitaire ont montré que LMDSrnass2 était exprimé de cellules intestinales moyennes, tandis que les expressions LMDRNASE3 sont très basses. Les résultats fournissent une preuve de taux de protéines pour la différence de fonction de deux enzymes DSRNA LMDSRNANASE2 et LMDSRNASE3 dans les sauterelles.