[Objectif] de mettre en place une méthode de détection rapide et efficace de méthodes de détection quantitatives quantitatives quantitatives en temps réel (PCR en temps) de la mutation H278R LEAP (SDHB) des effets multi-éléments et de vérification. [Méthode] Pure Pathogènes Séparation du comté de la Daxing de Beijing, atteignant des spores de plus de 24 Cilia Multi-Master, déterminée par la croissance du fil de champignon EC50, sélectionné au hasard 4 (s) et la résistance 8 étirement (R) (R) mesurent son taux de croissance de la munesthèse , spores de volume et agents pathogènes. Identifiez la chaîne de gène SDHB de base multi-majeurs mesurée avec des appâts pour détecter la variation de base SDHB. Basé sur la même chaîne d'acide nucléique et le même site Web SNP basé sur MULTICT SDHB, la possibilité de pénétrer dans la commande B-H278R-TY-F / R et spécifique B-H278R-2F / 2R14, est définie et optimisée et optimise les systèmes qui détectent le dosage de la PCR. temps et évaluez la spécificité, la fusion des courbes et la sensibilité de l'appât. Utilisez ce système, l'ADN et la suspension de spores contiennent des mutationsDifférent de H278R a été découvert. [Résultats] On a découvert que 24 souches ont été découvertes et des souches distinctes de 66,7%, la valeur EC50 est de 0,057-0 563 Phag & # 183; Ml-1; Les anti-antagonistes ont représenté 33,3%, la valeur EC50 était de 5 395-11,710 # 183; Ml-1. La résistance et les souches sensibles uniquement sur le taux de croissance des fibres de champignons sont nettement différentes dans des différences significatives et une corrélation négative significative entre la croissance du fil et la CE50. Il n'y a pas de différences significatives dans les spores et les agents pathogènes. L'analyse de séquence se trouve porter des mutations SDHB-H278R. Cette conception de la recherche Les amorces B-H278R-2F et B-H278R-2F2R14 sont spécifiques et que l'ADN uniquement des mutations multi-majeures SDHB-H278R est étendue et il n'y a pas de contraintes restantes. Normalement, quand -PCR trouve 91 pg & # 183; μL-1, la sensibilité de la PCR en temps réel peut atteindre 9,1 pg & # 183; μL-1, la sensibilité est 10 fois par rapport à la PCR commune. Standard des produits ADN génomique, les courbes standard PCR sont construites Les valeurs CT sont du termeBonnes relations linéaires avec des concentrations d'échantillons relatives, le coefficient de corrélation est de 0,9857, la performance de l'amplificateur est de 92,59%. Faire fondre l'absorption de la courbe de pointe unique, le paramètre d'appât à l'intérieur B-H278R-TY-F / R et spécifique B-H278R-2F / 2R14 représente un sommet spécifique unique à 87,81 ° C et 91,62 ° C. La courbe standard a été vérifiée. avec l'ADN et les spores suspendues. Les résultats montrent que l'échantillon opposé à la concentration descendante, la précision du système de détection incrémentielle et la limite ci-dessous est de 5% et la valeur attendue liée à la valeur du test (R2 = 0,999) 8 et R2 = 0,9922). [Conclusion] Établissez un système de détection quantitatif efficace, quantitatif et quantitatif comme une réalité pour détecter les mutations SDHB-H278R, qui peuvent fournir une base théorique à la dépendance à la résistance des médicaments.
2018, 51(24)
S51R51
6 mars 2019
Ce document académique portant sur mutation et intitulé Configurez ce système de site de mutation SDHB-H278R comme PCR en temps réel en Sciences agricoles de base Chinese Agriculture a été édité et complété par Légumes, Institut chinois de sciences agricoles, Beijing, 100081 de DanYanXia, SunBingXue, ZhuFaDi, XieXueWen a été édité et complété. Publié à 6 mars 2019 dans le journal Science agricole chinoise, volume 2018, 51(24), Plan national de R & D, Projet d'innovation de la science et de la technologie de la Chine Académie des sciences agricoles, de la biologie clé et du laboratoire de Nuong du ministère de l'Agriculture Agriculture et Agriculture sous copyright.