【Objectifs】 Par écrissure de la bibliothèque de la bibliothèque CDNA Grey Brand montre la myosyosine, TM peut à l'origine interagir avec les échelles noires, RBSDV) P10 Protéine. La recherche est destinée à être la myosine grise de la myosine (TM), le montrant dans des cellules procaryotes, de nettoyer la protéine TM, de la vaccination des lapins blanches et de sa préparation d'anticorps multicouches et d'une analyse supplémentaire sur les rôles gris et rbsdv dans le processus de fourniture de conditions d'anticorps. [Modal] Open Lecture Cadre, Orf) est déterminé en fonction de la hauteur des informations génétiques TM. L'ARN total de la peau grise est extraite et la méthode RT-PCR a été utilisée pour déterminer l'ORF du gelaTop gris et l'analyse de séquençage a été effectuée après que le transport PMD-18T a été analysé à l'analyse du logiciel DNASTAR et encode ses propriétés protéiques. La vérification des critères précis est associée à l'expression prokaryote vectorielle PET-32A (+) par ECOR V et BAMH I HUBERRICTION ENDONUCTASE. Le plasmide recombinant est converti E. COLI BL21 (DE3) et IPTG sont causés par 0,4 mmol® L-1 détecté après 4 heures après la manifestation de 4 heures après la détection de la protéine Fusion TM. Centrifugal Collecte des liquides ESCHERICHIA COLI collectés à l'échographie collectée et broyée a été collectée, exceptionnelle et précipitée a été collectée et l'expression de la protéine de fusion a été analysée par SDS-Page. La protéine synthétique soluble dans le surnageant filtré par l'agarose NI-NTA et la protéine Fusion TM est pure obtenue après une filtration sanguine de 100 mmol? L-1 imidazole et 0,01 mol? La solution PBST L-1 a été obtenue. Sérum et utilisez Elisa indirectement pour détecter des titrages à chaud. Après la protéine de fusion TM pure et la gris-prokioprotéine sont séparées par la page SDS, la détection de la balle occidentale est faite avec des anticorps polyclonaux TM pour analyser la spécificité de l'anticorps. [Résultats] L'analyse de la séquence montre la taille de l'ORF du TM Sphhy comme 852 BP. Cet orf a été pris en utilisant des copies et des séquences RT-PCR et des résultats montrent l'ARF de groupe TMLa combinaison gris synthétique est 852 BP, codé 283 acides aminés, la taille théorique de la masse moléculaire est de 32,6 kD. Aligner la séquence de trouver que les protéines codées sont conservées entre différentes espèces. Après TM ORF est clone dans le vecteur d'expression pET-32A (+) (+), l'expression E. coli BL21 (DE3) (DE3), le produit d'expression analysé SDS page, et la protéine de fusion est d' environ 55 kD, propriétaire Faible sous forme de protéine soluble, il y a également une petite quantité d'expression dans les corps inclus. protéine synthétique intégré dans le surnageant est affiné, et les anticorps polyclonaux sont préparés avec un lapin blanc immunitaire. Détermination des anticorps indiquent que les anticorps sont une meilleure sensibilité, Tester est supérieur à 1: 409600. détection de pureté des anticorps TM Polycody type protéine de fusion et la protéine de cuir gris a détecté une plage spécifique , environ 55 KD et d' environ 37 kD, ce qui indique que les anticorps avec une forte spécificité . [Conclusion] humanisé ORF de TM-Prolet proue et expression dans Escherichia coli inductionBL21 (DE3), affinée pour obtenir une protéine Fusion TM et un anticorps TM polyclonal très efficace a été préparé.